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蛋白質(zhì)純化濃縮新概念

蛋白質(zhì)的分離純化過(guò)程中,離子交換柱層析法為經(jīng)常使用的手段之一。但是由于離子交換柱層析法本身具有一些缺陷,其在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中,具有操作復(fù)雜、耗時(shí)、對(duì)小型樣品處理流速只能限制在1-10ml/min范圍內(nèi),流速過(guò)高會(huì)造成樹(shù)脂容易損壞等不足,并且離子交換柱層析法只能用于蛋白質(zhì)分離過(guò)程,而不能對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行濃縮。

為了解決這一難題,德國(guó)賽多利斯公司專(zhuān)門(mén)發(fā)明了微孔離子交換膜(SartobindTM)這一全新技術(shù)概念的產(chǎn)品。該產(chǎn)品具有非常高的實(shí)用價(jià)值,既可以與制備性液相色譜儀聯(lián)用,也可以與快速蠕動(dòng)泵連接,對(duì)于少量樣品的處理也可以采用注射器,一次試驗(yàn)即可將蛋白質(zhì)的純化和高倍濃縮工作同時(shí)完成,微孔離子交換膜具有耐壓力強(qiáng)、化學(xué)穩(wěn)定性高,吸附蛋白量大(2mg/cm2)、流速快(最高可達(dá)3L/min)、運(yùn)行時(shí)間短、操作簡(jiǎn)單方便等特點(diǎn)。利用該法進(jìn)行蛋白質(zhì)的處理和制備無(wú)論是克級(jí)或是公斤級(jí)所有操作都非常簡(jiǎn)單。

表1. 微孔離子交換膜(Sartobind™)技術(shù)參數(shù)

材質(zhì) 超穩(wěn)定交織醋酸纖維素,孔徑<3µm
化學(xué)官能團(tuán) 離子交換(見(jiàn)表2)
蛋白質(zhì)吸附容量 1-2 mg/cm2
蛋白質(zhì)回收率 >95%
流速/cm2xba 80-100 mL
清洗及再生 1N堿(e.g. NaOH);1N酸(e.g. HCl)
熱穩(wěn)定性 可在121°C高溫消毒
最大壓力 7 bar(125 psi)
pH適用范圍 pH 2-13

表2. 微孔離子交換膜(Sartobind™)化學(xué)官能團(tuán)

Sulfonic acid, 磺酸(S) 強(qiáng)陽(yáng)離子交換 R-CH2-(SO3)2-
Quaternary ammonium, 叔胺(Q) 強(qiáng)陰離子交換 R-CH2-N+-(CH3)3
Carboxyl, 羧基(C) 弱陽(yáng)離子交換 R-COO-
Diethylamine, 二乙基胺(D) 弱陰離子交換 R-CH2-N+-(CH2H5)2

MA5

MA15

MA100

Discs & Modules

即開(kāi)即用型 即開(kāi)即用型 即開(kāi)即用型 單層/膜包型

表3. 微孔離子交換膜(Sartobind™)技術(shù)規(guī)格

規(guī)格 形式 有效直徑 膜層數(shù) 吸附面積(cm)2 流速/1bar
MA5 即開(kāi)即用型 25mm 1 5 150ml/min
MA15 即開(kāi)即用型 25mm 3 15 50ml/min
MA100 即開(kāi)即用型 50mm 5 100 100ml/min
MA120 單層 142mm 1 120 6L/min
MA550 單層 293mm 1 550 30L/min
MA600X5 膜包型 142mm 5 600 0.5L/min
MA5500X10 膜包型 293mm 10 5,500 3L/min
   
上次更新時(shí)間:2016年03月18日
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